Como escolher os tubos PCR certos?

Jun 02, 2022

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Como escolher os tubos PCR certos?

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Resposta: Os tubos BKMAM PCR são adequados para instrumentos PCR convencionais e instrumentos PCR em tempo real no mercado (instrumentos BD, Beckman e Wanshi PCR).


Comparação de PCR quantitativo em tempo real, PCR digital e PCR tradicional:

Visão geral da PCR digital: meça a proporção de réplicas negativas para determinar o número absoluto de cópias.


Visão geral da PCR em tempo real: As medições são feitas à medida que ocorre a amplificação da PCR.


Visão geral da PCR tradicional: meça a quantidade de produto de PCR acumulado no final do ciclo de PCR.


A PCR digital é quantitativa?

R: Sim, a proporção de respostas RCR negativas se ajusta ao algoritmo estatístico de Poisson.


A PCR em tempo real é quantitativa?

R: Sim, porque os dados são coletados durante a fase exponencial (logarítmica) da PCR, durante a qual a quantidade de produto da PCR é proporcional à quantidade de molde de ácido nucleico.


A PCR tradicional é quantitativa?

R: Não, mas comparar a intensidade da banda amplificada no gel com um padrão de concentração conhecida pode fornecer um resultado "semiquantitativo".

 

Aplicações da PCR digital: quantificação absoluta de carga viral, quantificação absoluta de padrões de ácidos nucleicos, quantificação absoluta de bibliotecas de sequenciamento de última geração, detecção de alelos raros, quantificação absoluta de expressão gênica, enriquecimento e separação de misturas


Aplicações de PCR em tempo real: quantificação de expressão gênica, validação de microarrays, controle de qualidade e validação de ensaios, detecção de patógenos

, genotipagem de SNP, variação do número de cópias, análise de microRNA, quantificação de vírus, experimentos de siRNA/RNAi


Aplicações da PCR tradicional: amplificação de DNA, sequenciamento, genotipagem, clonagem molecular

Conclusão: Vantagens da PCR digital: não há necessidade de confiar em referências ou padrões, a precisão desejada pode ser alcançada aumentando o número total de réplicas de PCR, alta tolerância a inibidores, capacidade de analisar misturas complexas

Ao contrário da qPCR tradicional, a PCR digital responde linearmente ao número de cópias que surgem e pequenas diferenças de mudança de dobra podem ser detectadas.

 

Vantagens da PCR em tempo real: maior faixa dinâmica de detecção, sem necessidade de processamento pós-PCR, detecção capaz de cobrir alterações tão baixas quanto 2-vezes, aquisição de dados durante a fase exponencial da PCR, aumento no sinal de fluorescência do repórter com os amplicons resultantes Proporcional em número, as sondas de clivagem fornecem um registro permanente da clivagem dos amplicons


Desvantagens da PCR tradicional: baixa precisão, baixa sensibilidade, pequena faixa dinâmica < 2 logs, baixa resolução, não automação, apenas análise diferencial com base nas especificações, resultados não representados como números, quantificação insuficiente usando coloração com brometo de etídio, Pós-PCR


Para obter mais informações sobre tubos de tiras de PCR, entre em contato conosco a qualquer momento:

Michael Peng

Changde BKMAM Biotecnologia Co., Ltd

Endereço: Edifício 1, Leste da Zona Industrial de Novos Materiais,

Zona de desenvolvimento econômico de Linli, Changde, 415200 Hunan

Tel: mais 86-17363688083

Mob: mais 8613450479355(whatsapp&wechat)

Skype: peng.michael2011

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